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本制品是在动物DNA纯化试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物及其他软体动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、乌贼、蜗牛等动物，可以有效去除海洋动物及其他软体动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

• 提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
  
• 提取到的基因组DNA完整性，其中最长可以到达长度一般在20～50kb。
  
• DNA纯净，OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30～50kb左右。
  
• 操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用苯酚氯仿等有机试剂。
  
• 应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。

• 使用前请先在海洋动物DNA纯化溶液C中加入17mL自备的无水乙醇，在专用洗柱液中加入60mL的自备无水乙醇。
  
• 切取不多于30mg的海洋动物及其他软体组织材料，放入装有200μL海洋动物DNA纯化溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。
  
  • 根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入自备的40μL RNase A溶液，振荡15秒，室温放置5分钟。
• 加入20μL蛋白酶K溶液，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至海洋动物组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
  
  • 不同动物组织裂解时间不同，通常需0.5～2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2～3次，每次振荡混匀15秒。
• 加入200μL海洋动物DNA纯化溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
  
  • 加入海洋动物DNA纯化溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
• 在混合液中加入200μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
  
• 将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个硅胶膜离心吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12000rpm离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
  
• 向离心吸附柱中加入500μL海洋动物DNA纯化溶液C，12000rpm离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 向吸附柱中加入600μL专用洗柱液，12000rpm离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
  
• 重复上步操作一次。
  
• 将硅胶膜吸附柱放回收集管中，12000rpm离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的专用洗柱液。
  
  • 这一步的目的是将吸附柱中残余的专用洗柱液去除，否则其中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
• 将硅胶膜离心吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50～200μL DNA洗脱液，室温放置2～5分钟，12000rpm离心1分钟，将溶液收集到离心管中。
  
  • 专用DNA洗脱液的体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12000rpm离心1分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0～8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。